Les périthèces qui renferment les ascospores hivernent principalement dans les cellules des feuilles sèches tombées au sol. La dissémination de Guignardia aesculi se réalise principalement par l’intermédiaire des ascospores dont la maturation s’effectue tôt au printemps, qui germent sur les jeunes folioles et infecte l'arbre peu de temps après le débourrement.

Les ascospores peuvent aussi être hébergées dans les crevasses de l'écorce des arbres.

Les conidies de la reproduction asexuée sont à l’origine de contaminations secondaires assez tard en saison.